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簡(jiǎn)要描述:果膠甲酯化程度測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:42℃生長(zhǎng)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)42℃ Growth Medium250克副溶血弧菌42℃生長(zhǎng)試驗(yàn)水解酪蛋白瓊脂進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Casein Agar Medium250克用于鑒別蠟樣芽孢桿菌分解酪蛋白試驗(yàn)葡萄糖銨進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Ammonium Dextrose Medium250克志賀氏菌的葡萄糖銨試驗(yàn)葡萄糖半固體發(fā)酵管進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Dextrose Semisolid Me
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實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
果膠甲酯化程度測(cè)試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S7011 |
商品介紹:
測(cè)定意義: 植物細(xì)胞壁中的果膠是植物初生細(xì)胞壁的主要成分,除了起結(jié)構(gòu)支撐、物質(zhì)運(yùn)輸?shù)茸饔猛?,還具有抵抗逆境的作用。果膠甲酯化程度影響了細(xì)胞壁的堅(jiān)韌程度及其抗性。 測(cè)定原理 果膠甲酯鍵經(jīng)皂化處理后釋放出甲醇,甲醇與2,4-戊二酮反應(yīng)顯色,在412nm下測(cè)定吸光值;同時(shí)半乳糖醛酸在70℃下與濃硫酸反應(yīng)生成5-甲?;?/span>-2-呋喃甲酸,5-甲?;?/span>-2-呋喃甲酸與3,5-二甲基反應(yīng)產(chǎn)生有色物質(zhì),在450nm下有最大吸光值。以甲醇生成量與半乳糖醛酸含量的比值代表果膠甲酯化程度。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、低溫離心機(jī)、酶標(biāo)儀、96孔板、恒溫水浴鍋、蒸餾水、硫酸。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
操作步驟:
1. 樣品的準(zhǔn)備:
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽(yáng)性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。
2 ug pCMV-SPORT6 TMTC1 pCMV-SPORT6 TMTC1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
HBI副溶血性弧菌生化鑒定條(新國(guó)標(biāo)) 5條/盒
100g 聚乙烯吡咯烷酮 40000 Polyvinylpyrrolidone(PVP40000) 室溫干燥保存
50T 溶藻弧菌PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
1 g L-Glutathione (reduced form)(抗氧化劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
250mL EDTA Solution(EDTA溶液),0.5M,pH7.4 EDTA Solution,0.5M,pH7.4 常溫保存
1.5mL 酵母tRNA溶液B(精提)(5mg/mL) Yeast tRNA Solution -20℃保存
2 ug pLenti6/V5-DEST pLenti6/V5-DEST 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
麥康凱瓊脂3號(hào) Maconkey Agar No.3 250g
1瓶 L7912細(xì)胞株 L7912 低溫運(yùn)輸和保存
PPLO肉湯 PPLO Broth 250g
果膠甲酯化程度測(cè)試盒微量法IKK gamma/IKBKG KB抑制蛋白激γ抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-CaMK2 alpha (Tyr231) 磷酸化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激2α抗體 規(guī)格: 0.1ml
GABRA3/GABA A Receptor alpha 3 G氨基丁酸受體α3抗體 規(guī)格: 0.2mlNIS 鈉碘轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
DAT1/LIM domain only 3 神經(jīng)細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子DAT1抗體 規(guī)格: 0.2mlH1N1 Hemagglutinin 2 甲型毒凝素抗體 規(guī)格: 0.1ml
DAP1 死亡相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlSGLT1/GLT 1 鈉-糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1抗體 規(guī)格: 0.1ml
human Fibrinogen Monoclonal 人纖維蛋白原單克隆抗體 規(guī)格: 0.2mlBPIL3 殺菌/通透性增加蛋白樣3抗體 規(guī)格: 0.2ml
MIA2 黑色素瘤抑制活性蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2mlCGA/ Chromogranin A 嗜鉻粒素A抗體 規(guī)格: 0.1ml
ChRM2/Acetylcholine receptor(M2) 毒蕈堿型乙酰受體抗體 規(guī)格: 0.1mlCYP2E1 細(xì)胞色素P450ⅡE1抗體 規(guī)格: 0.1ml
NTF97/KPNB1 親核素β1抗體 規(guī)格: 0.1mlATM 毛細(xì)管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
Matriptase 2 膜型絲蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2mlMEK1/2(MAPKK1) 絲裂原活化蛋白激激1抗體 規(guī)格: 0.1ml
LPAP 淋巴細(xì)胞磷蛋酸相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlERK2/MAPK1 絲裂原活化蛋白激1抗體 規(guī)格: 0.1ml
HRH4/GPCR105 組織胺H4受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
COPS8 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基8抗體 規(guī)格: 0.2ml
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