儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規(guī)則：

GB Others Cytomegalovirus/CMV 巨細胞病毒 HCMV gB 人細胞裂解液 (陽性對照) 雷尼替丁雜質B質量規(guī)格：美國進口Ranitidine Impurity B

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B6雷尼替丁質量規(guī)格：美國進口Ranitidine

CD59A Others Mouse 小鼠 CD59a / Protectin / MAC-IP 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-氨基-5,6-二氯-3(4H)-喹唑啉醋酸(阿那格雷雜質B)質量規(guī)格：美國進口2-Amino-5,6-dichloro-3(4H)-quinazoline Acetic Acid(Anagrelide Impurity B)

C26瘤 結腸癌3-羥基阿那格雷質量規(guī)格：美國進口3-Hydroxy Anagrelide

THLE-3人肝永生化細胞 THLE-3 human liver immortalized cell MD 21793的BEGM培養(yǎng)基(目錄號CC3170)雷洛昔芬4'-葡萄糖苷酸質量規(guī)格：美國進口Raloxifene 4'-Glucuronide
BxPc-3-EGFP-puro (慢病毒構建穩(wěn)定株)人原位胰腺腺癌細胞 BxPc-3-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) in situ pancreatic adenocarcinoma cells 1640+10% FBS+2μg/ml puromycin1酸二酯酶 (比活度：>20 U/mg，BC)質量規(guī)格：比活度：>20 U/mg，BCPhosphodiesterase I from Crotalus adamanteus Venom

IL2 Protein Human 重組人 Ierleukin-2 / IL-2 蛋白化丙啶(>95% (HPLC),BC)質量規(guī)格：>95% (HPLC),BCPropidium iodide

人食道上皮細胞(HEEC)(5×105 ) RN-c, 大鼠皮質神經(jīng)元 Rattus血管緊張素III質量規(guī)格：>97%,BRAngiotensin III,human

大額牛皮膚細胞;BFR-S3蜂毒明肽; 蜂針液明肽質量規(guī)格：BR,>97%Apamin

EPHB1 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphB1 / EPHT2 人細胞裂解液 (陽性對照) 枸櫞酸氯米芬,克羅米芬質量規(guī)格：>98%,BRClomiphene
MIF Others Mouse 小鼠 MIF / Migration Inhibitory Factor 人細胞裂解液 (陽性對照) 鐵蛋白(馬脾)，英文名或英文縮寫：HSF，級別：BR，10-20u/mg，規(guī)格：100u

16HBE 人支氣管上皮細胞1.10-癸二醇 1,10-Dqccnqdiol 11-47-0

CL-0263BGC-803(人胃癌細胞)5×106cells/瓶×2D-扁桃醋 Mcndqlic ccid 611-71-

RDFs, 大鼠成纖維細胞MES,FREEACID,MONOHYDRATEMES緩沖液,一水超級

Asp2人胚胎腎細胞轉化細胞;FC33 人腎小球內皮細胞*培養(yǎng)基 100mL60668-01-1L-脯酸芐酯鹽酸鹽L-Proline benzyl ester xy7nochloride
Hoechst33342/PI雙染試劑盒BRL-3A細胞，大鼠正常肝細胞 SK-N-SH(神經(jīng)母細胞瘤細胞) 人髓母細胞瘤細胞;Daoy櫟櫻酸(標準品)Roburic acid質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

CSF2 Protein Rat 重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標簽)連翹苷(標準品)Phillyrin質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

SW626(人卵巢癌細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H5N1 (A/chicken/ Yamaguchi/7/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 連翹酯苷A(標準品)Forsythoside A質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

人食道平滑肌細胞HESMC連翹酯苷B（標準品）Forsythoside B質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

STXBP3 Others Human 人 STXBP3 / UNC-18C 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 蓮心堿（標準品）Liensinine質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

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