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產品名稱 | SmoISmlI,10 U/µL |
檢測方法 | 詳見說明 |
規(guī)格 | 200U |
貨號 | BK-S64402 |
儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
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測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
OLFM4 Others Human 人 OLFM4 / Olfactomedin-4 人細胞裂解液 (陽性對照) 氘代DMSO-D6(0.6ml x 10 )質量規(guī)格:D,99.9%Dimethyl Sulfoxide-D6
CM-H053人平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL氘代DMSO-D6(10 g )質量規(guī)格:D,99.8%+TMS 0.03%Dimethyl Sulfoxide-D6
DIRAS3 Others Human 人 ARHI / DIRAS3 人細胞裂解液 (陽性對照) 蛋白酶K(進分)質量規(guī)格:≥30units/mg protein,sigma分裝Proteinase K
人海馬星形膠質細胞HA-h蛋白酶K(Sigma)質量規(guī)格:≥30units/mg protein,sigma原裝Proteinase K
Hs 181.Tes細胞,正常人細胞 人癌細胞,HCC1937細胞 平滑肌細胞培養(yǎng)基SMCM-sf胰凝乳蛋白酶抑制劑質量規(guī)格:進分Chymostatin
人口腔角質細胞(HOK)( 5×105 ) NSC,大鼠神經干細胞 Rattus9-(2-羥丙基-d6)腺嘌呤9-[2-(Hydroxypropyl-d6] Adenine質量規(guī)格:美國進口
猴腎細胞;Vero IgCD4(R)-9-(2-羥丙基)腺嘌呤(R)-9-[2-(Hydroxypropyl] Adenine質量規(guī)格:美國進口
FST Others Mouse 小鼠 Follistatin / FST 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-1酸甘油酸激酶3-Phosphoglyceric Phosphokinase質量規(guī)格:1000u/mg,Sigma分裝
HPB-ALL(懸浮) T細胞白血病1,5-二1酸-D-核酮糖/1,5二1酸核酮糖d-ribulose 1,5-diphosphate/RuDP質量規(guī)格:90.0%,Sigma
769-P人腎細胞腺癌細胞 769-P human renal cell carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS酸性蛋白酶;蛋白酶來自佐氏曲霉Acidic Protease from Aspergillus 質量規(guī)格:BR,50u/mg
人脂肪微血管內皮細胞HAMEC抗壞血酸;維生素C質量規(guī)格:AR;>99%Ascorbic acid;vitamin C
CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) 維生素C(標準品)質量規(guī)格:含量測定Ascorbic acid;vitamin C
非洲綠猴腎細胞;VERO十八胺; 十八烷基胺; 硬脂胺質量規(guī)格:AROctadecanamine
NCI-H157細胞,人非小細胞肺腺癌細胞 小鼠肉瘤細胞,S-180細胞 CM-R039大鼠胃粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基100mL山梨酸質量規(guī)格:AR,99%Sorbic acid
RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2DL-薄荷醇質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品DL-Menthol
SmoISmlI,10 U/µLHBE(人支氣管上皮樣細胞) 5×106cells/瓶×2 軟骨細胞培養(yǎng)基CM去噻唑基 利托那韋Desthiazolylmethyl Ritonavir質量規(guī)格:美國進口
腎動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)N-去羅格列酮-d4N-Desmethyl Rosiglitazone-d4質量規(guī)格:美國進口
RPRD1B Others Human 人 RPRD1B 人細胞裂解液 (陽性對照) 羅格列酮(鉀鹽)Rosiglitazone (potassium salt)質量規(guī)格:美國進口
小鼠腹水瘤細胞;S-180羅格列酮鹽酸鹽rosiglitazone 質量規(guī)格:美國進口
HPAEC細胞,人肺動脈內皮細胞 猴腎細胞系,BSC-1細胞 CL-0082F9(小鼠畸胎瘤細胞)5×106cells/瓶×25-羥基羅格列酮5-Hydroxy Rosiglitazone質量規(guī)格:美國進口
實驗通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現配。
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