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簡要描述:多功能氧化酶(MFO)測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:O/F培養(yǎng)基(HLGB) 英文名稱:O/F Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 氯化鈉結(jié)晶紫增菌液 英文名稱:Sodium Chloride Violet purple Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 氯化鈉蔗糖瓊脂 英文名稱:Sodium Chloride Sucrose Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 嗜鹽菌選擇性
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商品介紹:
測定意義: 多功能氧化酶又稱混合功能氧化酶,可產(chǎn)生降解反應,可使原化學物質(zhì)變?yōu)榈投镜幕驘o毒的物質(zhì)從體內(nèi)排出;還可產(chǎn)生激活反應,可使原化學物質(zhì)轉(zhuǎn)化為具有親電子性質(zhì),導致毒性增強,成為致突變物或終致癌物。近年來對混合功能氧化酶系與外源性化學物質(zhì)相互作用的深入研究,對于從分子生物學水平上進一步了解外源性化學物質(zhì)的毒作用具有重要意義。 測定原理: MFO催化對硝基苯甲醚產(chǎn)生對硝基,在405nm下有特征吸光值。 自備用品: 分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
多功能氧化酶(MFO)測試盒可見分光光度法 | 50管/48樣 | 可見分光光度法 | BK-01S6475 |
實驗結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質(zhì)要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準備:
a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
10mL DNA 稀釋液 DNA Diluent -20℃保存
2 ug pKK 223-3批次1 pKK 223-3批次1 低溫運輸,-20℃保存
飲用水和水源水檢驗培養(yǎng)基
1瓶 MDA-MB-435S細胞株 MDA-MB-435S 低溫運輸和保存
乳糖復發(fā)酵培養(yǎng)基 Lactose Broth 250g
25g N- 氨基甲酰甲基乙磺酸 ACES 常溫保存
乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基 Lactose Broth 250g
2mL 肽瓊脂糖 Glutathione Agarose 4℃保存,切勿冷凍
2 ug pSUPER-retro-EGFP pSUPER-retro-EGFP 低溫運輸,-20℃保存
100mL RNase-free CTAB溶液,20% 常溫
2 ug pCP20 pCP20 低溫運輸,-20℃保存
多功能氧化酶(MFO)測試盒可見分光光度法PPM2C 蛋酸2C抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-HDAC2(Ser394) 磷酸化組蛋白去乙?;?抗體 規(guī)格: 0.1ml
Acylglycerol Kinase 甘油酯激線粒體抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
Cathepsin G/CTSG 組織蛋白G抗體 規(guī)格: 0.1ml
ASH1L ASH1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
MRC1/CD206 巨噬細胞甘露糖受體抗體 0.2ml
ULBP1/N2DL1 UL16結(jié)合蛋白1蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
NYS48 NYS48蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
FUCA1/Alpha L fucosidase I α-L巖藻糖苷抗體 0.2ml
RELM beta/CCGR 結(jié)腸相關(guān)基因蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
PCDHGA9 原鈣粘蛋白γA9抗體 規(guī)格: 0.2ml
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