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簡要描述:二氫黃酮醇還原酶(DFR)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:改良MSRV培養(yǎng)基 英文名稱:MSRV Medium,Modified 產(chǎn)品規(guī)格:250g BPL瓊脂 英文名稱:BPL Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g BPLS瓊脂 英文名稱:BPLS Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g MIO培養(yǎng)基 英文名稱:MIO Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
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實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱:二氫黃酮醇還原酶(DFR)測試盒微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣
檢測方法:微量法
產(chǎn)品貨號:BK-01S6464
產(chǎn)品分類:氧化與抗氧化系列
商品介紹:
測定意義: 二氫黃酮醇還原酶是類黃酮合成途徑中的一個關(guān)鍵酶,在決定植物的花色、葉色、果色和其他經(jīng)濟器官的色澤及其營養(yǎng)品質(zhì)方面起著重要作用。 測定原理: 二氫黃酮醇還原酶作用于二氫槲皮素產(chǎn)生兒茶素,可與縮合形成紅色化合物,在500nm處有特征吸收峰。 需自備的儀器和用品: 研缽、低溫離心機、震蕩儀、氮吹儀、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、水浴鍋、無水乙醇、乙酸乙酯。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本: 先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 |
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
1瓶 HT-29(RFP)細胞株 HT-29(RFP) 低溫運輸和保存
2 ug pYCPlac22-EGFP pYCPlac22-EGFP 低溫運輸,-20℃保存
10次 百萬堿基級細菌(G-)DNAout
2 ug pAAV-LacZ pAAV-LacZ 低溫運輸,-20℃保存
含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆瓊脂(TSA-YE) Trypticase Soy-Yeast Extract Agar 250g
1瓶 293ET細胞株 293ET 低溫運輸和保存
96支 200μLRNase-free黃吸頭(盒裝已滅菌帶芯) 常溫
24 T 醛縮測試盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
250mL MES Buffer,0.2M,pH6.5 MES Buffer,0.2M,pH6.5 常溫保存
100mg P- 苯基 p-Nitrophenylphosphorylcholine(NPCC) -20℃保存
2 ug pLVX-Tet-3G pLVX-Tet-3G 低溫運輸,-20℃保存
二氫黃酮醇還原酶(DFR)測試盒微量法DAL1/EPB41L3 細胞骨架4.1蛋白家族DAL1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-p57 Kip2 (Thr310) 磷酸化周期蛋白依賴激抑制因子1C抗體 規(guī)格: 0.1ml
OLFM4 凋亡蛋白OLFM44抗體 規(guī)格: 0.2ml
SMC4 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml
CCL25/TECK 胸表達趨化因子抗體 規(guī)格: 0.2ml
C1GALT1 N-乙酰半糖胺糖蛋白3、β-半糖轉(zhuǎn)移1抗體 規(guī)格: 0.2ml
RAMP1 受體活性修飾蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
CKLFH6/CMTM6 趨化素樣因子超家族成員6抗體 規(guī)格: 0.2ml
KLHL3 Kelch樣蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-GNA12(Ser68) 磷酸化鳥苷酸調(diào)節(jié)蛋白12抗體 規(guī)格: 0.1mlTOP2 alpha DNA拓普西異構(gòu)ⅡA抗體 規(guī)格: 0.1ml
TRIM17/RNF16 環(huán)指蛋白16抗體 規(guī)格: 0.2mlGoat Anti-Chicken IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的羊抗雞IgG 規(guī)格: 0.1ml
Contactin 3 腦源性免疫球蛋白超家族蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1mlDonkey Anti-human IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml
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