當前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > PCR試劑盒 > 源性成分PCR試劑盒 > 48T 0.2PCR管腰果源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法
簡要描述:腰果源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法及公司相關(guān)產(chǎn)品葫蘆巴堿鹽酸鹽(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Trigonelline 小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA檢測試劑盒MouseVascularEndothelialcellGrowthFactorD,VEGF-DELISAkit 96T/48T 石蠟切片組織IKB-ALPHA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑
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產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品名稱:腰果源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法
產(chǎn)品規(guī)格: 48T 0.2PCR管
產(chǎn)品貨號:BK-P97255
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。產(chǎn)品僅用于科研
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品特點:
1. 使用化學修飾的熱啟動聚合酶,反應特異性高,*程度地避免了非特異擴增;
2. 反應緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應靈敏快速,40個循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強,反應重復性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復雜樣本中的靶基因進行檢測分析。
在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,zui后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
特異性熒光標記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標記有報告基團(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標記有熒光淬滅基團 (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內(nèi)標定量:
內(nèi)標(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細胞中的表達量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標定量結(jié)果代表了樣本中所含細胞或基因組數(shù)量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
磺基水楊酸鈉 sulfosalicylate質(zhì)量規(guī)格:AR 大量微藻菌基因組DNA萃取試劑盒(高多糖/酚)5 水泡病毒(SVDV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
亞硝基紅鹽Nitroso R Salt質(zhì)量規(guī)格:AR RatIerleukin9,IL-9ELISA試劑盒大鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T HumanPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISA試劑盒人1酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
玫瑰紅
甲基鈣黃綠素藍水合物[用于配位滴定銅時的指示劑]質(zhì)量規(guī)格:用于配位滴定銅時的指示劑Methyl Calcein Blue Hydrate 英文名稱Epithelialneuophilactivatingpeptide-78ELISAKit小鼠上皮中性粒細胞活化肽(ENA-78).規(guī)格:96T/48T 大鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
6,7-亞甲二氧基-4-甲基-3-馬來(>98.0%(HPLC)(N))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(N)6,7-Methylenedioxy-4-methyl-3-maleimidocoumarin TOP10電轉(zhuǎn)感受態(tài)細菌5X100微升 人血管內(nèi)皮細胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)試劑盒 Human VEGFR-3/Flt-4 ELISA Kit
4-甲基-6,7-亞甲基二氧代(>99.0 %(GC))質(zhì)量規(guī)格: >99.0 %(GC)4-Methyl-6,7-methylenedioxycoumarin rabbitmaixmetalloproteinase4,MMP-4ELISA試劑盒兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)ELISA試劑盒 ,英文名: PR3 Ab-IgG ELISA Kit
7-甲氧基-3-羧酸(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)7-Methoxycoumarin-3-carboxylic Acid 小鼠白介素27(IL-27)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-27 ELISA Kit RatIerleukin32,IL-32ELISA試劑盒大鼠白介素32(IL-32)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
GPR56 Others Human 人 GPR56 / TM7LN4 人細胞裂解液 (陽性對照) D-lsoleucineD-異白酸25克BR,98%
MDA-MB-468 人癌細胞3-安 3-(cminomqthyl)pyridinq 3731-2-0
HCC827人非小細胞肺癌細胞 HCC827 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSDiallyisophthalate間酞酸二1丙酯10毫克AR,98%
SCGB1A1 Protein Human 重組人 Uteroglobin / SCGB1A1 蛋白 (His 標簽)CHAPSOCHAPSO超級5G82473-24-3RT
人胚胎肌肉組織來源細胞;CCC-HSM-2 人小氣道平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL766-96-1(4-溴本基)乙炔4-Bromopxenylacetylene
腰果源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法人少突膠質(zhì)前體細胞(懸浮生長)cDNAHOPC-os cDNA5-尿苷三嶙酸三鈉鹽shēng huà shì jì容量:5克
LCN2 Others Rat 大鼠 LCN2 / NGAL 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 茜素黃R Alizarin yellow R 2243-76-7 25G 通用試劑
KM小鼠網(wǎng)織細胞肉瘤瘤株;LⅡ內(nèi)基四輕本二加臘酐 Himic cnhydridq 86-6-0
TE-1細胞,食管癌細胞 人食管癌細胞,EC97076細胞 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HC
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